NIBSC 18/118 HCT 15癌癥基因組國際標準品的簡介

品牌：英國NIBSC標準品

CRM code（貨號）：18/118

英文名稱：1st International Standard for HCT 15 Cancer Genome

描述：HCT 15癌癥基因組國際標準品

產(chǎn)品用途：

材料18/118為凍干、純化的人HCT 15細胞基因組DNA（gDNA）。材料具有與PIK3CA c.1633G>A（E545K）相關(guān)的一致性變異百分比，以及每二倍體人類基因組質(zhì)量的一致性變異和PIK3CA總拷貝數(shù)?？赏ㄟ^應(yīng)用計算（見附錄I）稀釋材料，以產(chǎn)生PIK3CA c.1633G>A（E545K）變異百分比范圍內(nèi)的標準品。該材料擬用作校準二級標準品、試劑盒和分析的一級標準品。材料不作為運行控制。該材料經(jīng)外部實驗室檢測，可作為下一代測序（NGS）和數(shù)字PCR（dPCR）的標準。除了PIK3CA c.1633G>A（E545K）臨床相關(guān)變體外，材料還包括可用于NGS分析驗證的非臨床相關(guān)變體（見附錄II）。該材料由世界衛(wèi)生組織（WHO）生物標準化專家委員會于2019年建立，作為WHOdi一個個HCT 15癌癥基因組國際標準，NIBSC材料代碼18/118。

材料的使用：

在復(fù)原之前，不得嘗試稱量凍干材料的任何部分

a、 如上文第6節(jié)所述打開安瓿。

b、 在室溫下用100μl無核酸酶水將凍干材料復(fù)原。

c、 使用移液管將樣品轉(zhuǎn)移到無核酸酶管中，確保收集到zui大可用體積。

d、 使材料在室溫下復(fù)原1小時，并用移液管充分混合。1x Tris-EDTA緩沖液中的DNA濃度現(xiàn)在約為50ng/μl，但建議在使用前使用自己的定量方法進行確認。不應(yīng)擔(dān)心材料中可能出現(xiàn)的白色斑點。

e、 該變體材料可與材料18/164（野生型）結(jié)合，以任何選定的變體百分比生成標準；見附錄I。

f、 將所需量添加到您的分析中。可進一步稀釋材料（使用無核酸酶水或合適的緩沖液），以達到適合您的分析的DNA濃度。

g、 一級和二級標準應(yīng)在同一分析中進行分析，以便為二級標準賦值。

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